《利用可诱导内皮特异性报告基因小鼠分析小鼠心脏发育过程中瓣膜内皮-间充质转化的动态变化》【PDF】

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利用可诱导内皮特异性报告基因小鼠分析小鼠心脏发育过程中瓣膜内皮-间充质转化的动态变化
刘亚会，虞鑫豪，何玉龙
（苏州大学唐仲英血液学研究中心，苏州，215123）
摘要：目的：内皮向间充质转化是心脏瓣膜发育的重要过程，该过程异常影响心脏瓣膜的形态发生与功能。目前对心脏瓣膜内皮向间充质转化的变化规律与相关信号机制尚不完全明确。
本研究利用可诱导内皮特异性报告基因小鼠模型，探究不同发育阶段小鼠心脏瓣膜内皮向间充质转化的变化，为进一步解析心脏瓣膜发育的调控机制提供依据。
方法：本研究利用Rosa26-mTmG;Cdh5-CreERT2小鼠，通过在不同时间点诱导内皮细胞特异性报告基因表达，分析瓣膜内皮向间充质转化的变化规律，具体包括胚胎期E9.5-E14.5、新生鼠第1天与3周龄小鼠、以及成年8周龄小鼠。
结果：利用Rosa26-mTmG;Tek-Cre小鼠结合免疫组化的分析表明，小鼠胚发育早期心垫结构内瓣膜细胞几乎均为GFP/PDGFRa阳性；结合可诱导内皮特异性报告基因小鼠模型（Rosa26-mTmG;Cdh5-CreERT2）开展的分析表明，在胚胎E9.5与E10.5的心脏瓣膜中可检测到大量的内皮细胞向间充质细胞转化，即GFP/PDGFRa双阳性细胞：胚胎发育中后期（E11.5-E14.5），心脏瓣膜内皮细胞向间充质细胞的转化逐渐减少，仅心脏瓣膜纤维层侧内皮细胞呈现GFP/PDGFRa双阳性细胞；新生鼠阶段和成年鼠阶段，小鼠心脏瓣膜内皮向间充质转化的比例明显下降，即除瓣膜纤维层侧少量内皮细胞为GFP/PDGFRa双阳性外，瓣膜内几乎检测不到GFP阳性细胞。
结论：在小鼠胚胎发育中期（E9.5-E10.5），心脏瓣膜内存在活跃的内皮向间充质转化过程，该过程在胚胎发育后期呈下降趋势、以及在正常生理条件下的新生鼠与成年阶段小鼠心脏瓣膜中较少发生。
关键词：心脏发育；瓣膜形成；内皮细胞；内皮-间充质转化；可诱导报告基因小鼠
中图分类号：Q955